单克隆与多克隆抗体

抗体是免疫蛋白那在宿主防御感染者（例如病毒，细菌和真菌）中扮演着基本角色。免疫功能这些Y形蛋白取决于它们结合的能力抗原，在刺激免疫反应的细胞上释放或发现的分子。

b眼神在宿主免疫中角色，抗体被证明是有价值的研究和治疗目的也。两种类型的抗体 - 多克隆和单克隆 - 为研究科学家提供了不同的方法来检测或量化靶抗原很大程度上是由于特异性和亲和力的差异。在本文中，我们更详细地描述了多克隆和单克隆抗体，并考虑如何将每种类型用于各种应用。

什么是多克隆抗体？

一旦监测免疫细胞检测到宿主中的抗原，免疫系统就会经历一系列分子事件，可通过刺激的B细胞诱导多克隆抗体的产生。多克隆抗体 ¹ 由生物化学不同的副膜片组成，抗原的抗原结合位点的抗原结合位点可以与同一靶抗原上的不同结合位点具有特异性结合。

多克隆抗体对研究应用具有吸引力，因为它们的高亲和力对抗原抗原的高亲和力及其对溶液中靶抗原表现出的微小变化的相对耐受性的相对耐受性。例如，多克隆抗体通常比其单克隆抗体在诊断测定中的敏感性更高，因为它们的生物物理多样性对靶抗原。这些功能也可以更有效地有助于清除病原体 ² 比单克隆抗体。然而，在大规模使用多克隆抗体的可行性受到我们无法以一致性来繁殖这些蛋白质的因素。

您如何生成研究多克隆抗体？

为了产生适合研究目的的多克隆抗体，必须首先向实验室动物注射肽，蛋白质，分子或刺激免疫反应的全细胞。一旦宿主免疫系统产生针对注射抗原的抗体，就必须从动物的抗血清中收获并纯化它们。从动物血清中纯化多克隆抗体的一种方法是通过应用抗原涂层的磁珠，免疫后的沉淀或色谱法。 ³ 在这种基于亲和力的纯化方法降低了最终多克隆人群中的非特异性抗体之后，这些抗体准备用于基于检测的方法，例如蛋白质印迹，免疫组织化学和酶联免疫吸附测定。

单克隆和多克隆抗体之间的差异

什么是单克隆抗体？

与多克隆抗体不同，单克隆抗体 ⁴ 由高度特异性的蛋白质组成，这些蛋白质识别抗原上的单个表位。产生单克隆抗体离体通过杂交瘤，一种永生的细胞系具有产生B细胞等抗体的能力。

您如何生成研究单克隆抗体？

杂交瘤的产生涉及从免疫小鼠中与永生的骨髓瘤细胞融合。 然后根据靶抗原特异性和反应性筛选所得杂交瘤的克隆。由于单克隆抗体对单个表位具有很高的特异性，因此它们可以证明对研究科学家和临床医生都有用。

单克隆与多克隆抗体 - 关键差异

特性	单克隆抗体	多克隆抗体
抗体种群	同质	异质
结合特异性	识别靶抗原上的单个表位	识别靶抗原上的多个表位
灵敏度	更好的蛋白质定量	低量蛋白
交叉反应性	由于高特异性而降低	由于生物物理多样性而越高
生产成本	更昂贵	便宜
起源	刺激B细胞的单个谱系；杂交瘤	刺激B细胞的多个谱系

多克隆和单克隆抗体的使用

定义多克隆和单克隆抗体的实用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和敏感性。抗体的特异性取决于其结合结构域与靶抗原之间的相对亲和力，而存在其他分子。这种特异性的剥削对于免疫研究人员和临床医生至关重要，因为许多应用利用多克隆和/或单克隆抗体来特异性检测靶分子。结合抗原特异性，抗体的灵敏度是确定其在实验室中有用的重要参数。

高灵敏度抗体非常适合诊断应用⁵像免疫沉淀，横向流量测定，免疫组织化学一样Western印迹和酶联免疫吸附测定法（ELISA）由于它们能够识别低水平的靶抗原。免疫沉淀是一种通过使用专门结合抗原的抗体从混合物中分离出抗原的分析技术。然后，可以通过固定的抗体或磁珠进一步处理所得的抗原抗体复合物，从而使抗原抗体复合物可以在分析之前与混合物分离。

像免疫沉淀一样⁶可以使用多克隆或单克隆抗体检测溶液中的靶抗原。间接和三明治ELISA是两种免疫测定形式，它们在整个过程中使用两种类型的抗体：单克隆抗体通常首先使用（主要），因为它们对靶抗原的高特异性；多克隆抗体由于二级试剂而更有用，因为它们具有高灵敏度的低信号的能力。⁷除了ELISA之外，抗体还可用于检测技术，例如免疫组织化学和流式细胞仪，因为它们可以在具有高分辨率的复杂组织或细胞内检测抗体 - 抗原构建体。

确认制造商对抗体的特异性和敏感性的确认使ELISA等免疫测定法取决于如何使用抗原和抗体，从而使这些测试高度使用。例如，由于其能够识别抗原上多个表位的能力，因此需要高度敏感的测试来检测未知病原体的免疫测定将受益于多克隆抗体。如果先前已经表征了病原体或抗原，则在下游应用中使用单克隆抗体进行进一步表征可能更合适。

在实验室之外，可以使用抗体来增强，模仿或恢复免疫系统攻击疾病靶标的能力。除某些例外，单克隆抗体比多克隆抗体更适合于治疗目的，因为它们的同质性，对单个表位的高特异性及其低反应性。⁸这些特性对于有效的癌症疗法尤其重要，因为肿瘤细胞能够逃避或阻断免疫系统。单克隆抗体疗法对癌细胞的功能的某些方式包括涉及直接结合以诱导细胞死亡和间接机制的机制，这些机制阻止了肿瘤免受生长因子和血液供应的影响。⁹

参考

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