肌萎缩性侧索硬化症（ALS）是一种主要影响运动神经元的神经退行性疾病。不幸的是，只有两种药物批准治疗这种疾病，这两种药物都不会将患者的生存增加超过几个月。这种清醒的现实凸显了对新ALS治疗开发的迫切需求，这在临床试验中受到候选药物的高失败率所困扰。这种高失败率表明需要对临床前筛查策略进行重新评估。ALS患者疾病的标志之一是运动神经元中神经丝轻链（NFL）异常低。此外，将NFL恢复到正常水平可阻止ALS神经元的标志性表型变化。因此，我们想建立一个临床相关的筛查平台，以识别ALS患者衍生的运动神经元中NFL表达为正常水平的化合物。在Brainxell，我们建立了新技术，以快速将ALS患者诱导的多能干细胞（IPSC）分为大量神经元。然后，我们使用基因组编辑技术将NFL与纳米酸酯酶（NLUC）报告基因融合，从而实现了高通量筛选（HTS）系统，该系统可在72 h暴露于每种化合物后72 h后监视NFL的表达水平。该测定法适应了HTS要求，包括：大批量，1536孔格式，最小的井孔变化，短期培养，用自动分配器进行镀板和低试剂量。 Applying a quantitative HTS approach, we screened the LOPAC, NPC, and MIPE libraries (>6,000 compounds) in a dose dependent manner. Compounds that increase NFL expression by >30% (to approximately normal levels) were considered hits. From these screens we identified 80 hit compounds that are currently going through secondary validation. Preliminary data look promising. For example, two of these hits restore normal expression of NFL with no observed toxicity.