免疫测定用于多种蛋白质组学和基因组应用比利时罗马尼亚比分直播药物发现与发展，包括监测毒性，检测药物反应生物标志物，评估临床试验中的治疗反应等等。

尽管盛行，即使是最好的从业者也很难以完全相同的方式运行每一个免疫测定法。由操作员之间的微小差异，缓冲液和试剂的产品变化，甚至实验室环境条件的微小变化引起的运行变化一直是药物发现和开发团队的持续挑战。比利时罗马尼亚比分直播

在免疫测定中平衡吞吐量，特异性和可重复性

问题的一部分是由于免疫测定的序列性。每当从单独的反应或单独的井中产生结果时，就有可能引入混杂变量。对于许多应用程序，尤其是高通量的应用程序，多路复用提供了一致性，并允许科学家显着提高其测定的可重复性。但是，在许多应用程序中，必须分别对分析物进行分析，尤其是当必须将诸如交叉反应之类的问题纳入方程式中时。

COVID-19大流行为许多研究人员带来了挑战方面和中心。测量针对SARS-COV-2病毒的抗体的同种型 - 应该直接且可重现的过程受到技术方案的阻碍，这些方案需要在单独的反应中被单个报告基因检测到这些同种型。这些方法的结果并不总是像科学家想要的那样可比。

在理想的情况下，将在相同的反应或井中测量抗体同型和其他密切相关的分析物，以避免在单独的反应中固有的任何可能的变异性。使用单反应方法还可以减少样本量的需求和实验成本，因为所有数据点都会从单个反应中产生。

多路复用比单重法的优点

多年以来，科学家已经采用了多重测定法，与单独的单件免疫测定法相比，产生更健壮和可重现的结果 Elisas 。多重方法有几种不同的方法，但是通常，多路复用测定通过测试单个反应中的许多目标或分析物来提高结果的质量。^{1， 2} 此外，使用相同的实验条件对您测试的所有分析物，使分析物之间生成的结果更容易相当。

根据所使用的多重方法，这些高通量系统的其他优势通常包括微型反应，以降低样品输入需求并减少试剂的使用。它们还最大程度地减少了动手的时间，使科学家可以继续执行其他任务，并降低每个实验的成本。重要的是，他们可以在一次运行中检测数百个分析物。

最近，已经开发了多重技术的新功能，以进一步降低免疫测定中的可变性。使用两个报告基因通道的双重记者功能使科学家可以从样本中的每个分析物中收集两个不同的测量值。当测量结果来自相关元素，例如检测抗体同型，核酸或蛋白质中翻译后修饰的存在或不存在，或者在样品中的自由药物与绑定的药物，这将特别有用。

在最近的一项研究中，使用多重方法来检测SARS-COV-2病毒三种抗原的IgG和IgM抗体（Spike蛋白，受体结合结构域和Nucleocapsid蛋白）。 ³ 该技术涉及一个基于珠子的多路复用系统，在该系统中，双向报告基因捕获了每个珠的两个不同信号，从而有效地将研究产生的数据增加了一倍，并确保两种抗体同型的实验条件都是相同的。与传统方法相比，使用这种方法生成的数据可对病毒的免疫反应更加准确，更完整。

开发多重测定时需要考虑的因素

有几种多重免疫测定选项，选择实验室或实验的最佳选择时，有许多关键因素需要考虑：

• 尺寸：凭借溢价空间，系统的整体足迹可能很重要。对于最紧凑的选项，请查找具有集成触摸屏的系统 - 通过消除对单独的显示器，键盘和其他外围设备的需求，可以节省工作台空间。
  
  
• 容量：有些实验室可能需要询问十几个分析物，而另一些实验室需要为每个样本进行数百个分析物多重分析。确保不仅评估您当前的多重需求，还要评估您未来的需求如何变化，以确保您选择的平台将继续支持您的研究多年。
  
  
• 反应类型：市售的多路复用平台可能会以固态运行反应 - 通常将材料与幻灯片或板块结合 - 或在悬架中。某些样本类型可能在一种或另一种类型中表现更好，因此这是检查的重要元素。
  
  
• 双重记者功能：如果直接比较任何给定分析物的两个不同信号的能力在您的研究中很有用，请考虑寻找此功能。具有两个报告基因通道有助于免疫反应研究（抗体同型），药理学研究（自由药物与结合药物）和功能研究（将甲基化与未甲基化的核酸进行比较，或磷酸化的蛋白质与非磷酸化蛋白质进行比较）。

可重复性趋势

几年前，制药和生物技术公司的科学家承认了所谓的“ 可重复性危机 ”，这是从无法从内部研究或已发表论文中重新创建实验结果的，即使仔细遵循最初使用的方法。 ^{4 ，，，， 5} 随着整个生物医学群落努力提高可重复性，多路复用已成为产生更可比较和更精心控制的免疫测定结果的重要工具。 ⁶ 这些多重平台的改进，例如引入两个记者渠道，应继续通过提供更多可变性的数据来​​为更广泛的社区服务。

参考

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2. Tighe PJ，Ryder RR，Todd I，Fairclough LC。Elisa在多重时代：潜力和陷阱。蛋白质组学临床应用。2015; 9（3-4）：406–422。doi：10.1002/prca.201400130

3. Angeloni S，Cameron A，Pecora ND，Dunbar，S。用于基于多重珠的流量分析系统的快速，多重双向报告IgG和IgM SARS-COV-2中和测定。J VIS Exp。2021; 170：e62487。doi：10.3791/62487

4. Begley C和Ellis L.提高了临床前癌研究标准。自然。2012; 483,531–533。doi：10.1038/483531a

5. Prinz F，Schlange T，Asadullah K.信不信由你：我们可以依靠有关潜在药物靶标的公开数据？Nat Rev Drug Discov。2011; 10：712。doi：10.1038/NRD3439-C1

6. Dias D，Van Doren J，Schlottmann S等。对多重Luminex分析的优化和验证，以量化对人乳头瘤病毒6、11、16和18的中和表位的抗体。临床诊断实验室免疫。2005; 12（8）：959–969。doi：10.1128/cdli.12.8.959-969.2005