原代细胞培养的介绍

细胞培养程序是用两种类型的细胞进行的：

原代细胞 - 直接从人类或动物组织分离的细胞使用酶促或机械方法。一旦隔离，它们就会将其放置在人工环境中，塑料或玻璃容器，这些塑料或玻璃容器，这些玻璃容器和含有含有必需营养素和生长因子的专用培养基以支持增殖。原代细胞可能有两种类型 - 粘附或悬浮液。粘附的细胞需要附着以生长，据说是锚定依赖性细胞。粘附细胞通常源自器官组织。悬浮细胞不需要附着来生长，据说是锚定的细胞。大多数悬浮细胞从血液系统中分离出来。一些组织衍生的悬浮细胞可用，例如肝细胞或肠细胞，适用于ADMET应用。尽管原代细胞的寿命通常有限，但与细胞系相比，它们具有很大的优势。在进行原发性细胞培养时，研究人员正在获得研究供体的机会，而不仅仅是细胞。 Several factors such as age, medical history, race, and sex can be considered when building an experimental model. With a growing trend towards personalized medicine, such donor variability and tissue complexity can only be achieved with use of primary cells and are difficult to replicate with cell lines that are very systematic and uniform in nature and do not capture the true diversity of a living tissue.

细胞系 - 长时间不断传递的细胞并获得了同质基因型和表型特征。细胞系可以是有限的或连续的。永生或连续的细胞系已通过基因突变或人工修饰获得无限期增殖的能力。有限的细胞系已进行了20-80段的培养，之后他们进行了介绍。优选使用细胞系为方便起见，因为它们易于处理并广泛发布。但是，它们不太喜欢作为生物学相关的选择，因为它们已经失去了与之隔离的原始组织的真实特征。已知串行传代导致细胞系中的基因型和表型变异。变化通常距离原始组织的变化很远，而它们不模仿它们体内环境非常紧密。不代表原始组织的细胞可能会导致假阴性或假阳性发现。

关于使用原代细胞与细胞系的争论继续挑战研究人员。广泛理解的是，原代细胞在生物学和生理上更相关体外工具比细胞系研究人类和动物生物学。但是，数十年来，细胞系一直用作标准工具。多年来，串行传递，错过或污染的细胞系已进入出版物。例如，关于细胞系质量的评论总结说，有18-36％的细胞系被错误识别或交叉污染（Hughes P等，2007）。有趣的是，最近的一项研究表明，到目前（Horbach等，2017）。在同一篇文章中，作者发现，大约有32,755篇文章报告了有关错误识别细胞的研究报告，而这些细胞又被估计还有500万篇论文所引用。

即使单元线是声称是的类型，随着时间的推移，选择性压力和遗传漂移也会导致细胞系显示降低或改变功能。通常情况下，细胞系在串行传播过程中会突变，结果表明原始供体的基因型和表型变异。例如，Shaw等人证明了人类肾脏肾细胞系HEK 293，它是由Hek细胞原代培养物的腺病毒转化得出的，与神经元的相似之处比肾细胞更大¹。蛋白质组学表型的生物信息学分析表明，HEPA1-6细胞系缺乏线粒体，反映了与原发性肝细胞相比的代谢途径的重排（Pan等，2009）。

查看进一步的参考文献，讨论与使用细胞系相关的问题：

• 癌症难题 - 早期药物发现的临床成功增加比利时罗马尼亚比分直播
• 自然日报 - 公告：解决细胞错误身份的时间
• 遗传和转录进化改变了癌细胞系药物反应
• 在线之间阅读 - 新文章引用细胞系中的遗传漂移如何引起实验方差

正如研究界认识到改进研究的关键性一样，接受并认识到使用可靠的构件（即试剂，细胞），这是开发良好临床前模型的基础，这同样重要。对使用细胞系进行研究的担忧引起了许多期刊，包括自然出版集团，需要所有提交研究的细胞线认证。赠款申请也受到了例如国立卫生研究院最近修改其资金指南，以确保仅使用高质量资源来进行研究²。

参考：

¹Shaw等。（2002）。Faseb J 16（8）：869-71

²https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/not-od-15-103.html

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