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通过多路复用细胞死亡和生物发光caspase-1活性评估检测凋亡检测
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通过多路复用细胞死亡和生物发光caspase-1活性评估检测凋亡检测

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通过多路复用细胞死亡和生物发光caspase-1活性评估检测凋亡检测

凋亡是一种独特的免疫原性形式的细胞死亡,取决于炎症体激活,当模式识别受体(PRR)感觉微生物感染或细胞应激时会引起。caspase-1是炎性症的重要组成部分,通过处理细胞因子并引起细胞死亡来介导这种先天的免疫反应。除了caspase-1外,其他炎症性caspase(小鼠和胱天蛋白酶-4中的caspase-11,5中的caspase-11,5)还可以裂解气体D,并引起对某些细胞内微生物感染的响应。然而,在这种情况下也激活了caspase-1,因此caspase-1激活与细胞死亡一致是凋亡的可靠指标。理解PRR感应导致细胞死亡以及何时不能理解先天免疫反应的复杂性至关重要。我们已经开发了一种方便的方法,可以通过在同一测定中多路复用,我们的同质,生物发光的caspase-1活性测定法与膜覆盖,稳定的DNA染料以检测细胞死亡。与细胞死亡(例如乳酸脱氢酶(LDH))测定的终点测定相反,DNA染料可实时使用。可以随着时间的推移监测细胞死亡,并且首次检测到caspase-1分析可以确认凋亡。或者,可以去除培养基以测试caspase-1释放,从而使细胞可通过多种均值测量细胞死亡。我们显示了人THP-1单核细胞和小鼠J774A.1巨噬细胞中的凋亡的例子。
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