自1991年以来，莱姆病一直是美国全国认可的状况，并且是北美和欧洲最常见的媒介传播疾病。¹自1991年以来，美国莱姆病的发病率几乎翻了一番，莱姆病现在是东北州以及明尼苏达州和威斯康星州的特有。疾病控制与预防中心（CDC）估计，每年约有30万人患莱姆病，但是每年仅报告约35,000例。这种差异很大程度上是由于这一事实，即许多案件未报告给全国性的疾病监测系统（NNDSS）。²监视数据的其他局限性包括数据包括每个州捕获和分类案件的能力，并且该数据是由居住县而不是曝光县捕获的。¹在下面的文章中，我们探讨了莱姆病测试的当前状态，并分享了将来如何改善诊断时间的观点。

什么是莱姆病？

莱姆病是一种细菌感染，通过被感染的黑腿壁虱咬伤传播给人类。莱姆病的病因，属的细菌疏螺旋体，被称为螺旋体，以其独特的开瓶器形状。³一些疏螺旋体已经确定了物种（spp。），并与包括北美在内的不同地区有关（Borrelia Burgdorferi），欧洲和亚洲（Borrelia afzelii和Borrelia Garinii）。在美国，B. Burgdorferi由鹿tick传播（ixodes肩cap）在东北地区，中大西洋和中北部地区，而西方的黑腿tick虫（ixodes pacificus）在太平洋海岸传播疾病。⁴最近，还有一个物种B. Mayonii，在威斯康星州西北部和明尼苏达州收集的黑腿壁虱中发现了，也发现还引起莱姆病。⁵

传播，症状和治疗选择

壁虱通常附着在难以看见的区域，例如腹股沟，腋窝和头皮，并且由于其尺寸小（<2 mm若虫阶段）而难以识别。对于莱姆病的传播，必须将壁虱附着36至48小时。⁴莱姆病的早期症状可能从tick虫咬伤后的3至30天开始，包括发烧，发冷，头痛，疲劳，肌肉和关节酸痛以及淋巴结肿胀。⁶大约70-80％的人会经历红斑偏头疹（EM）皮疹，随着时间的流逝，有时会逐渐扩展，有时会形成经典的“牛眼”外观。tick虫咬伤后几天到几个月的症状包括头痛，面部麻痹，关节炎（莱姆关节炎），关节和神经疼痛，头晕和不规则的心跳（莱姆心炎）。⁶

莱姆病也可以具有神经学的参与。神经莱姆病（神经性疾病）是涉及周围或中枢神经系统的莱姆病的继发症状，发生在约10-15％的未治疗莱姆病患者中。⁷对神经系统的攻击通常以颅骨炎，面部瘫痪和感觉障碍为特征，通常为辐射炎（Bannwarth's综合征）。⁸脑膜炎，脊髓炎，脑炎和脑血管炎的频率较低。

幸运的是，莱姆病患者早日使用适当的抗生素治疗通常会完全康复。⁹莱姆病的确切剂量和治疗持续时间是临床表现类型的特异性。对于EM皮疹的患者，建议使用强力霉素，阿莫西林或头孢霉菌治疗口服抗生素。⁹对于莱姆心炎，莱姆关节炎或神经莱姆病，口服或静脉内抗生素的患者。

莱姆病诊断

莱姆病诊断可能很困难，因为没有EM皮疹的人仅仅基于症状。在这种情况下，实验室测试至关重要。^10,11在感染的急性阶段，不建议进行分子测试，因为血液中的DNA浓度很低，可能无法检测到。在感染后来，使用关节液作为样品时，分子测试对莱姆关节炎的诊断具有高灵敏度（表1）。¹²

血液中抗体的检测是莱姆病诊断的黄金标准（表1）。^12,13CDC在1995年建立了两层测试算法，称为标准两层测试算法（STTT）。STTT由一线酶免疫测定（EIA）或免疫荧光测定法（IFA）筛选以进行抗 -Borrelia Burgdorferi抗体。随后通过B. burgdorferi-特定的IgM和IgG免疫印迹。^13,14根据症状的发作，必须进行IgG和IgM免疫印迹测试或仅进行IgG测试。在IgM免疫印迹测试中至少存在至少2个谱带，或者在10个可能的10个频带中，IgG免疫印迹测试中的5个频段至少存在2个。¹⁵

STTT提出了一些局限性：（a）在莱姆病的早期阶段，由于抗体浓度低，灵敏度很低。结果，假阴性可能发生。（b）免疫印迹结果的解释可能具有挑战性和主观，从而导致虚假阳性结果。^11,16,17由于这些局限性，进行了研究以提高莱姆病测试的准确性，并还建议对STTT进行替代测试。^11,17,1824年后，2019年7月，FDA清除了STTT的变化，称为修饰的两层测试（MTTT），用第二层EIA（ELISA或化学发光测定法）代替第二层免疫印迹测试，该测试可以同时检测IgM和IgG和IgG和IgG分别地。¹⁹此外，美国传染病学会（IDSA）的CDC和莱姆病指南通过添加MTTT更新了测试算法。^12-14

对于神经性诊断，CDC建议使用STTT或MTTT算法。¹³可以进行其他测试以确认阳性结果或排除其他神经系统疾病（表1）。例如，测试脑脊液（CSF）的鞘内抗体或CXCL13。^12,20,21

关于莱姆病诊断的未来观点

在FDA批准后，在美国，加拿大和欧洲的各种研究中都证明了MTTT的高性能。^22,23在美国，临床测试实验室已经实施了MTTT，越来越多的制造商提供与MTTT一致的解决方案。另一方面，某些实验室继续使用STTT或两者（MTTT和STTT），因为一些临床医生想知道免疫印迹中哪些带（抗原）是阳性的，以获得有关该疾病的更多信息，例如那些相关的抗原检测莱姆关节炎。¹²因此，预计两种CDC测试算法将在未来几年使用。

如果实验室打算在CDC建立的测试之外（或代替）进行替代测试，则必须根据州和本地准则验证使用相关测定作为实验室开发测试（LDT）的新测试。替代测试的一个例子是使用免疫印迹作为第二层测试，其中包含与CDC所要求的额外和/或不同的抗原。一个很好的例子是VLSE抗原，它代表了表达的可变主要蛋白质样序列。根据研究，在免疫印迹中添加VLSE抗原以检测IgG，可以在早期和晚期提高莱姆病测试的敏感性，同时保持高水平的特异性。^16,24-26

最近去欧洲或亚洲旅行的患者可能会受益于欧洲或亚洲的测试疏螺旋体除了美国物种外。由于抗原表位的相似性疏螺旋体物种抗体交叉反应在Borrelia Burgdorferi Sensu Lato复杂的。^27,28由于在某些情况下可能存在物种特异性抗体，因此为每个物种添加特定的抗原可以提高测试的敏感性。²⁹

由于莱姆病早期血清学的局限性，正在研究新测定。例如，分子生物学领域正在发展具有高灵敏度的新技术。^30,31在血清学中，新型抗原的发现至关重要。根据最近的一项研究，检测抗磷脂抗体可以在疾病早期阶段提高STTT敏感性。³²另外，针对T细胞响应检测疏螺旋体spp。已经探索了感染，这意味着T细胞反应测试可以帮助诊断早期莱姆病。^33-36

需要进一步的研究来支持CDC测试算法中的这种测试替代方案，并更好地了解新抗原的临床实用性和在感染的早期阶段的临床实用性及其与监测治疗和重新感染的相关性。

表格1：莱姆病早期和康复阶段的临床症状和测试。

	莱姆病阶段
临床症状/测试	莱姆病的早期阶段（tick咬伤后3-30天）	莱姆病的传播和慢性阶段 （> tick咬伤后30天）
临床症状	Em皮疹：可在70％–80％的患者中检测到 非特异性：发烧，发冷，头痛，疲劳，肌肉和关节酸痛，淋巴结肿胀	Em Rash：未观察到 莱姆关节炎：膝盖肿胀，颈部刚度 莱姆心炎：头脑昏暗，晕厥，呼吸急促，心pal或胸痛 神经红细胞增多：脑膜炎/脑炎
分子	PCR（血液效用有限）	莱姆关节炎：PCR（关节流体中最高灵敏度）
血清学	· Igm · 抗磷脂的抗体*	根据感染时间，可以在血液中检测到IgM和/或IgG 神经红细胞病（CSF测试）： · 鞘内IgM和/或IgG可检测到感染时间 · CXCL13上调
细胞反应	T细胞响应*	T细胞响应*

*需要进一步的研究来支持该测试的临床实用性。

关于作者：

Maite Sabalza，PhD是Perkinelmer公司Euroimmun US的科学事务经理。她的学术背景是传染病和诊断。

伊拉娜·赫克勒（Ilana Heckler），博士学位是Perkinelmer公司Euroimmun US的科学事务助理。她拥有化学生物学博士学位，用于研究一氧化氮的细菌血蛋白传感器。

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